مقایسه سینتیکی و ترمودینامیکی آنزیم آدنوزین د آمیناز روده و طحال

مواد و روش ها:نتایج سینتیکی و ترمودینامیکی اثر اینوزین به عنوان محصول واکنش آنزیمی و همچنین به عنوان یک مهارکننده روی آنزیم آدنوزین دآمیناز (ADA) روده و طحال در بافر فسفات ?? میلی مولار با ?/?=PH و در دمای ?? درجه سانتی گراد بدست آمده و از روش های اسپکتروفتومتری و تیتراسیون میکروکالری متری هم دما استفاده شده است. به منظور مقایسه پایداری ترمودینامیکی دو آنزیم ADA روده و طحال تغییرات جذب در ??? نانومتر در حضور غلظت های مختلف دودسیل تری متیل آمونیم برماید (DTAB) بعنوان غیر طبیعی کننده مورد بررسی قرار گرفته است. یافته ها: اینوزین که محصول واکنش کاتالیتیکی آنزیم ADA بر روی سوبسترای اصلی خود آدنوزین می باشد، اثر مهارکنندگی بر فعالیت کاتالیتیکی آنزیم داشته و به عنوان یک مهارکننده رقابتی برای آنزیم ADA محسوب می شود. مطالعات سینتیکی نشان داده است که میزان ثابت اتصال اینوزین به آنزیم ADA روده و طحال به ترتیب برابر با ??? و ??? میکرومولار می باشد که به خوبی با مقدار ثابت اتصال بدست آمده از روش میکروکالری متری هم دما (??? و ???میکرومولار) مطابقت دارد و بیانگر این است که ثابت اتصال اینوزین به آنزیم ADA روده، کوچکتر از ADA طحال می باشد. مقایسه پارامتر سینتیکی kcat یا راندمان و همچنین ثابت ویژگی kcat/Km نشان می دهد که راندمان و ثابت ویژگی ADAروده بیش از دو برابر ADA طحال می باشد. مقایسه مطالعات ترمودینامیکی هر دو آنزیم ADA روده و طحال نشانگر پایداری بیشتر ADA روده نسبت به ADA طحال است زیرا، [DTAB]1/2 و ?G(H2O) برای ADA روده به ترتیب معادل ??/? میلی مولار و KJ/mol ??/? است در حالی که برای ADA طحال برابر با ??/? میلی مولار و KJ/mol ??/?می باشد. نتیجه گیری: مقایسه پارامترهای سینتیکی و ترمودینامیکی بدست آمده برای آنزیم آدنوزین دآمیناز روده و طحال نشان می دهد که آنزیم آدنوزین دآمیناز روده از نظر سینتیکی فعال تر و از نظر ترمودینامیکی پایدارتر از آنزیم آدنوزین دآمیناز طحال می باشد. بنابراین توصیه می شود برای درمان بیماران مبتلا به نقص در فعالیت آنزیم ADA در انسان به روش آنزیم جایگزین از ADA روده با پایداری و فعالیت کاتالیتیکی بیشتر استفاده شود.